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本生闡述:成骨細胞礦化結(jié)節(jié)染色液(茜素紅s法)
骨代謝是破骨細胞骨吸收與成骨細胞骨形成的動態(tài)平衡過程,成骨細胞負責(zé)骨基質(zhì)的合成、分泌、礦化,是骨重建激活或終止的控制者,它在骨組織的創(chuàng)傷修復(fù)、骨組織的生長發(fā)育、骨量平衡中起著重要作用,是骨質(zhì)疏松、骨折等骨病研究的主要焦點。成骨細胞分化是其主導(dǎo)骨形成的前提與基礎(chǔ),在成骨分化過程中其最基本的生物學(xué)特征是骨基質(zhì)合成、分泌、礦化及成熟,而礦化結(jié)節(jié)是成骨細胞分化成熟的標(biāo)志,同時也是成骨細胞行使成骨功能的主要形態(tài)學(xué)表現(xiàn),觀察成骨細胞的礦化結(jié)節(jié)是研究成骨細胞分化的常用手段之一。成骨細胞礦化結(jié)節(jié)染色常用方法有四環(huán)素法和茜素紅S法,應(yīng)用茜素紅溶液對成骨細胞染色,茜素紅可與鈣離子螯合,產(chǎn)生深紅色或紫紅色的復(fù)合物,可用于鑒定干細胞是否已成功向成骨細胞分化。該試劑僅用于科研領(lǐng)域,不適用于臨床診斷或其他用途。
產(chǎn)品組成:
2×50mlStorage
試劑(A):固定液50mlRT
試劑(B)茜素紅染色液50mlRT,避光
使用說明書1份
自備材料:
1、磷酸緩沖鹽溶液(1×PBS,無鈣鎂)
2、蒸餾水
3、顯微鏡
操作步驟(僅供參考)
1、成骨細胞經(jīng)培養(yǎng),胰酶消化,接種培養(yǎng)于6孔板中,每孔1×105個細胞。
2、細胞聯(lián)系觀察、換液,培養(yǎng)14天。
3、小心吸除培養(yǎng)液,加入足量固定液固定15min
4、磷酸鹽緩沖液(1×PBS)洗滌各孔3次,每次3min。
5、加入茜素紅s染色液600μL 染色30min,可根據(jù)染色情況酌情增加或減少染色時間。
6、蒸餾水洗去染色液,肉眼可見細胞呈明顯的紫紅色。
7、光鏡下觀察拍照。
染色結(jié)果:
鈣結(jié)節(jié) 紫紅色-深紅色
注意事項:
1、茜素紅s染色時間要根據(jù)鈣鹽的含量來確定,一般情況下30min即可。
2、固定液宜揮發(fā),開啟后應(yīng)密封保存;如使用量大可用95%乙醇替代。
特別提醒:
1) 本公司所有產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員用于生命科學(xué)研究,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅。
2) 本公司所有產(chǎn)品必須由合格專業(yè)技術(shù)人員操作同時佩戴口罩/手套/實驗服并遵守生物實驗室安全操作規(guī)程!
成骨細胞礦化結(jié)節(jié)染色液(茜素紅s法) 天津本生 本生一直視質(zhì)量控制為企業(yè)的生命,追求企業(yè)競爭力的不斷提升。公司在經(jīng)營中始終秉承:遵紀(jì)守法,嚴(yán)于律己,寬仁以待,敢于承擔(dān)的企業(yè)精神作為標(biāo)準(zhǔn),以過硬的質(zhì)量和優(yōu)良的服務(wù)來維護和拓展市場,較大限度的滿足客戶的需求。與客戶的共贏,是我們的發(fā)展目標(biāo)。本生!您信任的合作伙伴。我們愿與您真誠合作,共創(chuàng)美好的未來。
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